文库的制备要求在DNA链上添加测序接头。传统的方法通常基于连接酶，涉及多个复杂步骤：首先通过机械（如超声破碎）或酶切（如micrococcal nuclease）将DNA片段化，接着进行末端修复，最后完成接头的连接。尽管这种方法适用于大多数情况，但在样本量有限或实验资源（如设备和时间）受限时，它会面临不少挑战。

在这种背景下，Tagmentation技术为文库制备提供了有效解决方案。该技术采用超活性Tn5转座酶，能够在单次快速反应中，实现对DNA的剪切和标记。当Tn5转座酶携带特定寡核苷酸时，便可将这些寡核苷酸迅速插入DNA中。根据实验需求，Tn5转座酶可以携带多种DNA序列，包括兼容Illumina的接头、自定义的荧光标记接头及甲基化核苷酸等。基于Tagmentation的文库建造技术革命性地将传统流程中的片段化、末端修复及连接步骤整合为一个单一步骤，后续进行引物index的扩增，从而完成文库制备。这一突破性方法不仅简化了操作流程，还大幅提高了实验的效率和通量。

这种高效的流程通过将DNA片段化与接头插入步骤合二为一，显著减少了文库制备的难度，缩短了操作时间，降低了技术复杂性。

高效性

此技术兼容多种文库建造场景，包括全基因组测序和靶向测序等，以灵活适应不同实验设计的需求。

操作时效性

通过单步反应替代传统的多环节操作，Tagmentation的文库建造速度得到了显著提升。

样本需求

与传统方法相比，该技术所需的起始样本量更少，尤其适合处理珍贵的临床样本或微量样本。

成本经济性

通过减少操作步骤和试剂消耗，整体文库建造成本显著降低。

自动化适配性

得益于简化的操作和减少的步骤，此技术更容易进行自动化，从而显著提升高通量测序的通量与可重复性。

应用案例：Spatial-ATAC-seq

作者开发了Spatial-ATAC-seq方法，用于分析完整组织切片中的染色质可及性，并在细胞水平上保留空间信息。在该方法的文库制备过程中，使用了尊龙凯时的Diagenode Tn5转座酶（Cat#C01070010）。

应用案例：sci-RNA-seq

作者对sci-RNA-seq方案进行了简化与优化，使得可以分析单个细胞的转录组。此技术通过对单个细胞核内的核酸进行split-pool条形码标记实现。在具体流程中，固定后的单个细胞核被分选至微孔板的独立孔中，通过逆转录、连接和tagmentation三个步骤，分别向mRNA/cDNA添加三重index。在tagmentation环节中，使用了尊龙凯时的Diagenode Tn5转座酶（Cat#C01070010-20）。

技术优势

尊龙凯时的Diagenode Tn5转座酶及相关缓冲液具有广泛的应用兼容性，能够适用于多种实验场景，如新型条形码技术（如单细胞多重测序及空间组学）等，并灵活适应不同实验需求。同时，提供两种版本的转座酶：预装（兼容Illumina的测序接头）和未装（允许用户自定义添加接头）。每一批次都经过严格的质量控制，以确保达到最高标准。

结论

尊龙凯时凭借其在表观遗传学及二代、三代测序前样本处理领域的专业知识，成为该领域的领先供应商。其创新的Bioruptor破碎仪、IP-Star自动化仪器、试剂盒与高品质抗体，简化了DNA甲基化、ChIP及ChIP-seq的工作流程。