细胞焦亡（Pyroptosis）是一种由炎症信号诱导的程序性细胞死亡方式，其显著特点是细胞膜出现穿孔，并伴随着细胞肿胀与破裂。这一过程主要依赖于炎性半胱天冬酶（如caspase-1、4、5和11）的活化，并伴随大量促炎因子（例如IL-1β和IL-18）的释放。相较于凋亡与坏死等其他细胞死亡方式，细胞焦亡在形态学特征、发生机制及调控方式上具有独特性。

为有效检测细胞焦亡，尊龙凯时推出的BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒采用比色光度法来评估细胞内焦亡相关蛋白酶Caspase的活化情况以及细胞膜的完整性。该试剂盒基于Caspase-1/4/5催化其相应底物生成黄色的pNA，而pNA在405nm附近具有强吸收能力，因此可以通过测定吸光度来监测细胞焦亡相关蛋白酶的活性。此外，试剂盒还利用非通透性荧光探针来检测细胞质膜的完整性。

尊龙凯时的BBcellProbe®试剂盒适用于使用酶标仪或荧光酶标仪，以及容量不超过100μl的分光光度计或荧光光度计进行细胞焦亡的检测。此外，还可提供荧光标记的AFC、R110和AMC等焦亡检测试剂盒，其中，荧光法的灵敏度显著高于分光光度法，推荐在具备荧光检测条件的实验室优先选择荧光法进行检测；如果没有荧光检测条件，则可以选择尊龙凯时的比色法细胞焦亡检测试剂盒，前提是需保证样品中细胞焦亡的程度足够高。

检测方法包括：
- 酶标仪/荧光酶标仪
- 分光光度计/荧光光度计
- 激光共聚焦显微镜
- 流式细胞仪

样本类型：
- 细胞

实验步骤：
一、配制裂解缓冲液和检测缓冲液
二、样品处理：
1. 收集细胞，离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞中加入50μl冷裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
4. 将样品置于冰上持续振荡25-40分钟。
5. 在4℃，10000×g条件下离心10分钟。
6. 将获取的上清液转移至另一个预先冷却的干净离心管中，置于冰上或-80℃冷冻保存备用。

三、对上述处理的上清样品进行蛋白定量。

四、进行焦亡检测。