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小鼠肺微血管内皮细胞分离培养技术——尊龙凯时带您深入探索生物医疗领域

发布时间:2025-02-28   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的小鼠肺微血管内皮细胞构成了半选择性屏障,这一屏障在肺气体交换、调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动中发挥着重要作用。除此之外,该屏障还具备代谢功能,能够执行一定的非呼吸相关功能。在肺损伤情况下,肺微血管内皮细胞成为活性氧类攻击的重要靶细胞之一。在肺炎的发生过程中,神经介质和氧化剂对内皮细胞产生影响,使得细胞间隙的渗透性增加,蛋白质从血液中进入间质,从而引发低氧血症以及可能导致成人呼吸窘迫综合征和非心源性肺水肿。

小鼠肺微血管内皮细胞分离培养技术——尊龙凯时带您深入探索生物医疗领域

小鼠的肺微血管内皮细胞来源于实验动物的正常肺组织。这些细胞为上皮样的多角形形态,能够贴壁培养,并通过CD31免疫荧光染色技术确认其为阳性,其纯度高于90%,且不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母及真菌污染。

尊龙凯时要求提供实验所需的仪器设备及试剂。仪器包括生物安全柜、CO2细胞培养箱、荧光倒置显微镜、高速冷冻离心机、电热恒温鼓风干燥箱及电热恒温震荡水槽。试剂方面则需使用T25细胞培养瓶、血球计数板、24孔板专用细胞爬片、胎牛血清和内皮细胞培养基等。

以下是小鼠肺微血管内皮细胞的分离与培养方法:首先,将5至10天龄的乳鼠浸泡在75%乙醇中,然后在生物安全柜内操作。接着,从胸部解剖乳鼠,取出双肺并放入预冷的PBS中,尽量去除结缔组织。然后,剪碎肺的边缘部分,将组织块转移到T25培养瓶中,倒置在细胞培养箱中培养2小时。两小时后,在培养瓶中加入2 mL的内皮培养基,小心将其正置,确保组织块不浮起。每3天更换2 mL培养基,当细胞开始从组织块中爬出后,改为每2天更换一次液体。当细胞融合度达到60-70%时,去除组织块,重新培养肺微血管内皮细胞。

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