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生物医疗实验:尊龙凯时液体培养基中的细菌培养步骤

发布时间:2025-02-25   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时生物实验步骤

生物医疗实验:尊龙凯时液体培养基中的细菌培养步骤

一、过夜培养

1. 将5ml预热的液体培养基转移至无菌的16mm或18mm试管中。

2. 使用接种环挑取单个细菌菌落,将其浸入培养液中,轻轻摇动接种环,使细菌均匀分散在培养基中。

3. 盖好试管,并置于摇床或转鼓式培养装置上,以60r/min的速度在37°C下培养,直至达到饱和状态(细胞浓度约为1X109至2X109细胞/ml,约需6小时)。

二、大体积培养

1. 在无菌的锥形瓶或搅拌瓶中,使用新鲜预热的培养液以1:100的比例稀释过夜培养物,锥形瓶的体积应至少为培养液体积的5倍。如不进行摇动培养,瓶子体积需在20倍以上,以保证充分通气。

2. 在37°C条件下,进行剧烈摇动培养(约300r/min)。

三、利用计数板监测生长情况

1. 使用一片干净的盖玻片覆盖清洁的计数玻片(或血球计)。

2. 小心地在盖玻片边缘滴加一小滴培养液,使其自然扩散到盖玻片下方。

3. 通过400倍相差显微镜观察,并按照每个小方块中所见的细菌数量计算浓度,约等于2X107细胞/ml。

四、利用分光光度计监测生长情况

由于仪器间存在差异,使用分光光度计前需用已知浓度的培养液进行校准。

1. 测量OD600值。为获得准确读数,需将培养液稀释至OD600<1。

2. 依据每0.1 OD值大约等于108细胞/ml来计算细菌浓度。

使用尊龙凯时高性能的仪器和耗材,能够有效提升生物实验的效率和精准度。确保每一步操作都严格按照科学标准执行,从而为生物医疗研究提供可靠的数据支持。